多年來對干細胞的定義不斷進行修正,并從不同的層面上來進行定義 。目前大多數(shù)生物學(xué)家和醫(yī)學(xué)家認為干細胞是來自于胚胎、胎兒或成人體內(nèi)具有在一定條件下無限制自我更新與增殖分化能力的一類細胞,能夠產(chǎn)生表現(xiàn)型與基因型和自己完全相同的子細胞,也能產(chǎn)生組成機體組織、器官的已特化的細胞,同時還能分化為祖細胞 。
間充質(zhì)干細胞是干細胞的一個研究分支,干細胞是一類具有自我復(fù)制和多向分化能力的細胞,它們可以不斷地自我更新,并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成人體組織或器官的細胞。干細胞是機體的起源細胞,是形成人體各種組織器官的始祖細胞。
一類存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等),具有多向分化潛力,非造血干細胞的成體干細胞。這類干細胞具有向多種間充質(zhì)系列細胞(如成骨、成軟骨及成脂肪細胞等)或非間充質(zhì)系列細胞分化的潛能,并具有獨特的細胞因子分泌功能,細胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究,以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。
間充質(zhì)干細胞的特性
1.對塑料的黏附的,細胞具有貼壁依附性。
2.特異性表面抗原表達-陽性和陰性的標(biāo)記物。
3.多能分化,在體外可以分化成成骨,脂肪和軟骨細胞。
間充質(zhì)干細胞的用途
1.神經(jīng)系統(tǒng)
間充質(zhì)干細胞分泌組作為神經(jīng)源性生態(tài)位調(diào)節(jié)劑∶ 可揭示基本原理和治療機會。
2.骨骼系統(tǒng)
間充質(zhì)干細胞用于控制骨關(guān)節(jié)炎∶最新技術(shù)和展望。
3.肝臟
間充質(zhì)干細胞用于肝臟修復(fù)的治療前景。
4.心臟
間充質(zhì)干細胞來源的炎性成纖維細胞可介導(dǎo)衰老心臟的間質(zhì)纖維化。
5.肺
間充質(zhì)干細胞來源的微泡在肺疾病中的作用。
6.腎臟
間充質(zhì)干細胞與慢性腎動脈狹窄。
7.胰腺
使用間充質(zhì)基質(zhì)細胞制備替代β細胞∶ 展望和未來努力方向。
8. 腫瘤免疫治療
改造間充質(zhì)干細胞可為消除腫瘤生長提供持續(xù)濃度的高效特異性抗體。
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)實驗
試劑:Gibco基礎(chǔ)培養(yǎng)基,Gibco胎牛血清,75%酒精
耗材:Nest 50ml離心管,Nest 10ml血清移液管,Nest T225透氣蓋細胞培養(yǎng)瓶 ,Nest 20μl吸頭
設(shè)備:離心機,水浴鍋,培養(yǎng)箱,移液槍,細胞計數(shù)儀,顯微鏡
準(zhǔn)備:將胎牛血清按比例適當(dāng)加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,配制成完全培養(yǎng)基。
實驗步驟:
1. 從-196°C液氮罐取出1支間充質(zhì)干細胞凍存管。
2. 即刻將凍存管置入37°C水浴鍋中勻速擺動,持續(xù)一分鐘左右,使直到管中只剩下最后一片結(jié)晶(注意:不要讓水沒過產(chǎn)品管)。
3. 用酒精擦拭管口。
4. 取20ml完全培養(yǎng)基加入離心管中,將融化好的細胞懸液加入到完全培養(yǎng)基中并充分混勻。
5. 取20ul混勻好的細胞懸液,用細胞計數(shù)儀計數(shù)。
6. 細胞懸液在1400rpm,室溫條件下,離心5分鐘,去上清。
7. 加入10-20ml完全培養(yǎng)基輕輕混勻細胞。
8. 每個T225細胞培養(yǎng)瓶中加入50ml完全培養(yǎng)基。
9. 按10 000-15 000個細胞/cm2接種細胞,平放搖勻使細胞分布均勻,在顯微鏡下觀察細胞分布狀態(tài),放入37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。