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2023-04-1834112 次瀏覽
第四期 | 細胞工廠擴大化培養之進階串聯篇


細胞培養是一項耗費心思與精力的工作,

當小伙伴們養的細胞已經在細胞板或細胞瓶中茁壯成長之時,

就需要給他們換一個大戶型的家。


上期我們聊到耐思細胞工廠密閉系統的優勢以及如何定制所需的密閉系統,

初步解決了防污染的理論問題。


配件都有哪些?

如何利用小配件將細胞工廠玩出花?

如何從單排獨棟進階成高階聯排別墅?

進階串聯篇,即將加載......

PART 1

細胞工廠配件





耐思神器—生物工藝配件



液體傳輸管



轉換接頭


其他配件



PART 2

聯排別墅指南



由于細胞工廠的培養特性,工藝放大過程中可以采用增加細胞工廠的數量的方式。


但當細胞工廠數量增多時,就會面臨多次開蓋操作造成的污染風險。


為了解決這個問題,我們就要用到一個很簡單的方式:細胞工廠連連看。


將細胞工廠從單個的單位組成一組,并且利用配件將多個細胞工廠組合成一個半封閉/封閉的系統。


3個40層細胞工廠串聯操作指南

(一種方式的演示)




PART 3

聯排別墅使用教程

(以10層細胞工廠為例)



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進液操作

1. 將細胞工廠串聯,將儲液桶上的管路安裝至蠕動泵,確保管路松緊適中,并與串聯的細胞工廠管路連接。


2. 將管路上所有軟管夾打開,打開蠕動泵。培養基通過管路進入串聯的細胞工廠。操作過程中盡量避免產生氣泡。

注:因進液速度不一樣,我們可以通過關閉相應軟管夾來控制進液量。

3. 當進液量足夠后關閉蠕動泵,并關閉所有管路上軟管夾。


4. 將軟管從蠕動泵中取出,斷開管路接口。將細胞工廠側放,使液面平均分配到每層,進液管路側朝下,空氣濾器側朝上,避免液體進入到空氣濾器中。


5. 順時針旋轉90℃,使加液口朝上,靜置后液體平均分配到每一層。緩慢將細胞工廠放至水平位置,將管路整理好或換成透氣蓋(過濾器組件亦可),然后放入細胞培養箱中孵育培養。

注:若管路末端熱封,在正常環境下進行管路對接或斷開即可,若管路末端為接頭,應在百級環境下進行管路連接或斷開。

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取液操作

1. 將細胞工廠串聯并側放(進出液管路側朝下,空氣濾器側朝上),將儲液桶上的管路安裝至蠕動泵,確保管路松緊適中,并與串聯的細胞工廠管路連接。


2. 打開所有軟管夾,將蠕動泵開啟,細胞培養液通過管路回收至儲液桶。


3. 收取一定量液體后將細胞工廠傾斜,便于取液。

注:取液時最好將細胞工廠放置支架上,若沒有支架,也可自行進行墊高,使細胞培養液更充分的流出。

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消化操作

1. 將管路與裝有消化液的儲液桶相連,打開蠕動泵,開始加入消化液。

注:因進液速度不一樣,我們可以通過關閉相應軟管夾來控制進液量。


2. 關閉蠕動泵并斷開接口,然后將細胞工廠側放,使消化液平均分配到每層,進液管路側朝下,空氣濾器側朝上,避免液體進入到空氣濾器中。


3. 順時針旋轉90℃,使加液口朝上,靜置后液體平均分配到每一層。


4. 緩慢將細胞工廠放至水平位置,將每個細胞工廠微微搖晃,使消化液覆蓋貼壁細胞,靜置消化。消化完成后將管路與收集容器相連,打開所有軟管夾后開啟蠕動泵,傾斜細胞工廠后開始液體轉移。

注:可以通過細胞工廠支架將底部抬高,防止液體殘留,也可自行進行墊高,使消化液更充分的流出。

 

5. 液體收集完成后關閉蠕動泵。由于生產工藝的區別,在使用細胞工廠進行大規模細胞培養時可能會采用不同的串聯方式,不同的生物工藝配件。


由于生產工藝的區別,

在使用細胞工廠進行大規模細胞培養時可能會采用不同的串聯方式,

不同的生物工藝配件。


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